(资料图片仅供参考)

1、RT-PCR简介 RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。

2、首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。

3、RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。

4、作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。

5、无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。

6、使用天为时代公司的总RNA提取系统(如目录号 DP405和DP406)，所获得的RNA的纯度高，基因组DNA污染少，用于RT-PCR系统可得到满意结果。

7、用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。

8、对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。

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